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轉(zhuǎn)染都有哪些途徑可以實現(xiàn)?

更新時間:2023-02-27      點擊次數(shù):2880

超聲波與電磁波相似,可被反射、折射和聚焦,其不同之處在于:者傳播時需要彈性介質(zhì),而后者則可在真空中自由傳播。在固體介質(zhì)中超聲波的縱向波和橫向波均可傳播,而在氣體和液體介質(zhì)中只有縱向波可傳播。紡織品染整加工一般為液液、液固相體系,因此對超聲波縱向波的研究更為重要。

  轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導(dǎo)入真核細胞的技術(shù),它是研究基因表達調(diào)控,突變分析等的常規(guī)工具。細胞轉(zhuǎn)染分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。瞬時轉(zhuǎn)染是指外源基因進入受體細胞后,存在于游離的載體上,不整合到細胞的染色體上。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指DNA整合到宿主細胞的染色體中。
  轉(zhuǎn)染途徑:
  1.電穿孔法:
  電穿孔靠脈沖電流在細胞膜上打孔而將核酸導(dǎo)入細胞內(nèi)。本法需用特殊設(shè)置(電穿孔儀),把懸浮狀態(tài)的受體細胞和供體DNA共同放入皿中(或杯中),再施以高壓電脈沖,能夠促進DNA通過細胞膜而進入胞內(nèi),并可整合到細胞的DNA中,使細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。若轉(zhuǎn)移的DNA為帶有選擇標(biāo)記基因的質(zhì)粒,也可在選擇培養(yǎng)基中進行鑒定。

  2.顯微注射
  本法是借助顯微注射器直接把DNA注射入核內(nèi),使之發(fā)生整合入受體細胞基因組中的技術(shù)。本技術(shù)需要有嚴(yán)密無菌的凈化室,以免敞開操作污染,同時要能有自動拉針儀以制備顯微針,一般用手動拉針器拉制時要能使針末端有一個0.6cm長的細部,太長易折斷,針尖開口為2-3μm間,針口小于1μm更佳,針尖開口大于5μm易刺傷細胞。

  3.基因槍
  基因槍依靠攜帶了核酸的高速粒子而將核酸導(dǎo)入細胞內(nèi)。可以將大分子導(dǎo)入細胞。



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