單細胞分離提取系統(tǒng)采用三點定位的原理,即根據(jù)三角形已知三個邊長可以確定筆所在的頂點原理,計算出筆所在的位置坐標(biāo),是一種測距定位模式。主要通過壓電換能器產(chǎn)生的快速機械振動波來減少目標(biāo)萃取物與樣品基體之間的作用力從而實現(xiàn)固--液萃取分離。設(shè)備采用多級逆流提取后,溶劑循環(huán)提取次數(shù)多、用量少、所需的蒸汽用量也相應(yīng)的節(jié)省了很多,有效成分殘留少,提取得率高。
主要是運用了超聲波的原理,由于超聲波自身所具有的性質(zhì)空化作用,機械效應(yīng)及熱效應(yīng),由于自身的這幾個特點決定了它對中藥提取的得天獨厚的優(yōu)勢,它利用自己的空化效應(yīng)和機械效應(yīng)能迅速作用于中藥材植物細胞的細胞壁,使得纖維素分子和果膠分子發(fā)生分離,細胞壁的架構(gòu)發(fā)生破壞,細胞內(nèi)容物比如多糖類、黃酮類、生l物堿類、淀粉等生物大分子就能沖破細胞壁這個屏障,溶出到提取溶劑中,在經(jīng)過離心、過濾排除掉一些大分子雜志物質(zhì),通過大孔樹脂吸附、離心、醇沉等方法分離得到我們想要的物質(zhì)??傮w來說l大的優(yōu)點就是收率比傳統(tǒng)方式有大幅提高,能耗少,提取時間短,經(jīng)濟效益高等優(yōu)點。
單細胞分離提取系統(tǒng)的分離小技巧:
1、縮短制備單細胞懸液的時間,以保留細胞活力;
2、考慮使用細胞篩來過濾出細胞團塊或雙細胞;
3、注意緩沖液的選擇,包括分選和收集溶液;
4、如果您打算在分選后培養(yǎng)細胞,請使用對數(shù)生長期的細胞,并確定培養(yǎng)條件;
5、在分選轉(zhuǎn)染后的細胞時,通常在轉(zhuǎn)染后72小時進行,以提高細胞群的生存能力;
6、如果采用熒光抗體來分離稀有細胞,請在染色前離心抗體,以便去除任何可能被誤認為是靶細胞的熒光顆粒;
7、對于單細胞基因組學(xué)應(yīng)用,在分選后別忘了離心平板,以確保細胞在孔的底部;
8、選擇一種可靠的分析技術(shù)來評估分選細胞的數(shù)量和質(zhì)量。